電泳是一種電動(dòng)過(guò)程,它利用電荷場(chǎng)將流體中的帶電粒子分離。它在生命科學(xué)中常用于分離蛋白質(zhì)分子或DNA,并且可以根據(jù)分子的類(lèi)型和大小通過(guò)幾種不同的步驟來(lái)實(shí)現(xiàn)。程序在某些方面有所不同,但都需要電荷源,支持介質(zhì)和緩沖溶液。電泳法在實(shí)驗(yàn)室中用于根據(jù)大小,密度和純度分離分子。
電泳是實(shí)驗(yàn)室中常用的一種技術(shù),用于根據(jù)大小分離帶電分子,例如DNA。
凝膠電泳是實(shí)驗(yàn)室中常用的一種技術(shù),用于分離帶電分子,例如DNA ?,RNA ?和蛋白質(zhì)?根據(jù)它們的大小。
當(dāng)電流通過(guò)凝膠時(shí),帶電分子穿過(guò)凝膠。
在凝膠上施加電流,以使凝膠的一端帶正電荷,而另一端帶負(fù)電荷。
帶電分子的運(yùn)動(dòng)稱(chēng)為遷移。分子向相反電荷遷移。因此,帶負(fù)電荷的分子將被拉向正末端(相反的方向吸引!)。
凝膠由可滲透的基質(zhì)(有點(diǎn)像篩子)組成,當(dāng)電流通過(guò)時(shí),分子可以穿過(guò)該基質(zhì)。
較小的分子在凝膠中的遷移速度更快,因此比較大的分子遷移速度更慢,因此遷移距離更短,因此較大的分子可以遷移。結(jié)果,分子按大小分開(kāi)。
凝膠電泳和DNA
電泳使您能夠區(qū)分不同長(zhǎng)度的DNA片段。
DNA帶負(fù)電,因此,當(dāng)電流施加到凝膠上時(shí),DNA會(huì)向帶正電的電極遷移。
較短的DNA鏈比較長(zhǎng)的DNA鏈穿過(guò)凝膠的速度更快,從而導(dǎo)致片段按大小順序排列。
使用染料,發(fā)熒光?標(biāo)簽還是放射性的?標(biāo)記使分離后的凝膠上的DNA可見(jiàn)。它們將在凝膠上顯示為條帶。
具有已知長(zhǎng)度片段的DNA標(biāo)記通常與樣品同時(shí)在凝膠中穿行。
通過(guò)將DNA樣品的條帶與DNA標(biāo)記的條帶進(jìn)行比較,可以算出樣品中DNA片段的大致長(zhǎng)度。