透析袋是一種重要的生化分離技術(shù),可以將分子根據(jù)其分子量、電荷大小、形狀等物理性質(zhì)分離開來。透析袋的主要原理是利用半透膜對(duì)水和小分子物質(zhì)通透性較高,而對(duì)大分子物質(zhì)通透性較低的特性,實(shí)現(xiàn)對(duì)分子的篩選和分離。
透析袋通常是由纖維素、纖維素醋酸鹽、聚氨酯、聚乙烯醇等材料制成的。其中,纖維素透析袋是最為常見的一種,其制備過程如下:
1. 將透析袋放入去離子水中浸泡數(shù)小時(shí),去除潛在雜質(zhì)和污染物。
2. 將透析袋提出,將其輕輕擠干。
3. 準(zhǔn)備混合物,將一定比例的濃度為20%的纖維素溶液、醋酸和去離子水混合,并攪拌均勻。
4. 將透析袋浸入混合物中,靜置一定時(shí)間,在方式靜態(tài)結(jié)束后,透析袋將產(chǎn)生非常均勻的薄膜。
5. 將透析袋撈出,徹底洗凈,并晾干。
6. 利用超薄的切割刀切割出所需尺寸的透析袋。
透析袋的使用
使用透析袋需要注意以下幾點(diǎn):
1. 首先要根據(jù)樣品的分子量和要求選擇適當(dāng)?shù)耐肝龃?。透析袋的孔徑大小一般可根?jù)分子量來決定。一般來說,大分子物質(zhì)需要使用孔徑較大的透析袋,而小分子物質(zhì)需要使用孔徑較小的透析袋。
2. 使用前要充分清洗和消毒好透析袋,避免可能的雜質(zhì)干擾。
3. 將待透析溶液注入透析袋中,注意不要將遞進(jìn)溶液充滿透析袋,一般用總體積的2/3或3/4即可。
4. 需要定時(shí)或連續(xù)更換遞進(jìn)溶液,以保持透析的有效性。
5. 透析袋使用完畢后,一定要洗凈并放置于衛(wèi)生環(huán)境下保護(hù)好,以便下次使用。
透析袋的應(yīng)用
透析袋的應(yīng)用具有廣泛的可塑性,一般可應(yīng)用于以下幾個(gè)方面:
1. 分離生物大分子:透析袋可以結(jié)合酶催化、分子生物學(xué)等技術(shù),對(duì)蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子進(jìn)行快速、有效的分離。
2. 去除樣品中的冗余離子和雜質(zhì):透析袋具有良好的離子選擇性和物理屏障作用,可以使得樣品中的冗余離子和雜質(zhì)得到濾除。
3. 制備高層次純化產(chǎn)品:透析袋可以制備高度純化的蛋白質(zhì)、基因、病毒等生物制品。
4. 大體積透析:透析袋可以進(jìn)行大規(guī)模的樣品透析,因其簡(jiǎn)單、快速,且費(fèi)用低廉,因此在大體積樣品透析方面具有廣泛的應(yīng)用前景。
5. 藥物配伍:透析袋可以實(shí)現(xiàn)藥物分離和配伍,可以將多種藥物進(jìn)行篩選和篩選,實(shí)現(xiàn)藥物劑量的優(yōu)化和藥物治療的有效性。